陸道培醫(yī)療集團(tuán)王卉主任擔(dān)任通訊作者的又一流式細(xì)胞術(shù)專家共識重磅發(fā)布！

2024年7月出版的《中華檢驗醫(yī)學(xué)雜志》上，中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會委托陸道培醫(yī)療王卉主任、中國中醫(yī)科學(xué)院廣安門醫(yī)院劉貴建主任、國家癌癥中心/國家腫瘤臨床醫(yī)學(xué)研究中心/中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院腫瘤醫(yī)院崔巍主任擔(dān)任通訊作者，組織來自全國26個省、自治區(qū)、直轄市的57家醫(yī)療機構(gòu)共71位專家共同參與的《流式細(xì)胞術(shù)臨床檢測圖文報告書寫專家共識》重磅發(fā)布。

這一專家共識是三位通訊作者共同擔(dān)綱的第五篇重磅流式細(xì)胞術(shù)（FCM）專家共識，對于推動中國FCM的規(guī)范化和發(fā)展進(jìn)步，起到極大的作用。

2022年開始，三位通訊作者在臨床工作與行業(yè)交流中，發(fā)現(xiàn)FCM室間結(jié)果互認(rèn)和會診困難，雖然試劑的入室驗證、檢測方案、儀器質(zhì)量控制、設(shè)門方法以及人員的主觀判斷是其中的重要環(huán)節(jié)，但是在這種高端技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)化流程前路漫漫的情況下，最簡單、最快速、最實用的方法，是首先規(guī)范化圖文報告的書寫，可以解決絕大多數(shù)典型病例。為此，疫情期間，王卉主任首先根據(jù)三位通訊作者，以及中國中醫(yī)藥大學(xué)東直門醫(yī)院楊曦明、河北燕達(dá)陸道培醫(yī)院陳曼醫(yī)師、中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院血液病醫(yī)院王慧君主任，江蘇省人民醫(yī)院（南京醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院）吳雨潔主任四位執(zhí)筆人的初步探討和集體意見后，撰寫出第一版意見稿，并進(jìn)一步召開網(wǎng)絡(luò)擴(kuò)大會議探討，最終形成10條專家共識意見，并附帶免疫分型和微小殘留?。?/span>MRD）兩個圖文報告的樣板。

本專家共識的適用范圍和主要內(nèi)容都一哪些？

本共識適合各類醫(yī)療機構(gòu)臨床實驗室和健康體檢中心等相關(guān)單位人員。共識主要規(guī)范了FCM臨床檢測報告中的基本信息、方法學(xué)描述、結(jié)果分析與結(jié)論、圖片展示、審核與簽發(fā)等內(nèi)容。

FCM臨床檢測報告的基本信息包括哪些？

FCM臨床檢測報告的基本信息主要包括患者信息、臨床信息、申請信息、樣本信息4個部分。如有其他可能影響檢測結(jié)果的相關(guān)信息（如特殊治療或樣本狀態(tài)）應(yīng)予以備注。

FCM臨床檢測報告的方法學(xué)描述包括哪些？

FCM臨床檢測報告的方法學(xué)描述包括：儀器及試劑信息、熒光素標(biāo)記抗體組合方案、樣本制備方法和樣本檢測信息等。

FCM臨床檢測項目分為兩大類：臨床診斷項目（如免疫分型和MRD）和非診斷性項目（例如免疫細(xì)胞亞群檢測），前者檢測方案復(fù)雜，需進(jìn)行方法學(xué)描述，以供實驗室間交流及結(jié)果互認(rèn)；后者檢測靶標(biāo)和抗體方案具有一定通用性，可不描述或簡要描述方法學(xué)。

共識1：在FCM臨床檢測圖文報告的方法中，建議提供流式細(xì)胞儀、分析軟件、主要熒光素標(biāo)記抗體的相關(guān)信息，對疾病具有重要診斷價值的抗體需具體到抗體類別和克隆號；其他主要試劑注明廠家或配制方法。推薦強度：強烈建議。

共識2：對FCM的樣本制備信息予以簡單描述，提供主要檢測管的熒光素標(biāo)記抗體組合方案（可在圖片中標(biāo)注），簡述關(guān)鍵操作步驟；樣本制備完成后，若不能立即上機檢測，需注明保存條件與時間；注明收集的細(xì)胞總數(shù)。推薦強度：一般建議。

FCM臨床檢測報告的描述方式有哪些？

FCM臨床診斷項目如免疫分型和MRD需提供完整的檢測結(jié)果、結(jié)論，并附帶FCM彩色二維點圖。免疫細(xì)胞亞群的臨床檢測報告一般只需提供檢測結(jié)果（多以表格形式提供，附帶健康群體參考區(qū)間），除非具有明確檢測目的或臨床截斷值的項目，否則一般不提供結(jié)論，且無需提供附圖。

FCM臨床檢測報告結(jié)果中的術(shù)語描述規(guī)范？

FCM臨床診斷項目的檢測報告主要描述抗原表達(dá)的結(jié)果，包括抗原表達(dá)的比例和強度。其中抗原表達(dá)比例的描述涉及閾值，而表達(dá)強度的描述涉及內(nèi)對照細(xì)胞群。

大多數(shù)抗原表達(dá)與否的判斷使用表1，如有研究結(jié)果支持，也可采用其他特殊閾值并注明。例如，早期前體T急性淋巴細(xì)胞白血病/淋巴母細(xì)胞淋巴瘤CD1a和CD8陰性表達(dá)要求低于5%；而急性白血病系別判斷中，關(guān)于髓過氧化物酶陽性的定義為高于3%～28%；其他特殊情況，如靶向治療中涉及的腫瘤細(xì)胞靶點篩查，除了陽性和陰性，還需給出腫瘤細(xì)胞特定抗原的表達(dá)百分比）。

關(guān)于抗原表達(dá)強度，建議使用增強（bright，bri）或減弱（dim）描述病理性細(xì)胞（例如惡性、克隆性、異常細(xì)胞）的抗原表達(dá)強度改變；使用高（high,hi）或低（low,lo）描述非病理性細(xì)胞（如免疫細(xì)胞亞群和正常內(nèi)對照細(xì)胞）的抗原表達(dá)強度差異。

FCM臨床檢測報告的結(jié)果如何描述？

FCM臨床診斷項目（如免疫分型和MRD）的檢測報告需對樣本中主要細(xì)胞群特別是異常細(xì)胞群的百分比及抗原表達(dá)情況進(jìn)行客觀描述，同時根據(jù)抗原表達(dá)情況判斷異常細(xì)胞群體所代表的血細(xì)胞系別和成熟階段，結(jié)合臨床信息給出相關(guān)疾病診斷或提供傾向性意見。

共識3：FCM臨床診斷項目（如免疫分型和MRD）的檢測報告需提供完整的檢測結(jié)果、結(jié)論和彩色二維點圖。檢測結(jié)果需客觀描述樣本中主要細(xì)胞群情況：（1）腫瘤細(xì)胞、異常細(xì)胞、正常細(xì)胞群占有核細(xì)胞百分比，必要時描述亞群細(xì)胞占某群細(xì)胞的百分比甚至單位體積的細(xì)胞絕對數(shù)；（2）目的細(xì)胞抗原表達(dá)比例（陽性表達(dá)或者部分陽性表達(dá)、陰性表達(dá)），必要時提供表達(dá)百分比；目的細(xì)胞抗原表達(dá)強度（bri、dim、heter）；特殊標(biāo)志物需提供熒光強度（MdFI或MFI），必要時選擇陰性對照細(xì)胞或熒光微球進(jìn)行MdFI或MFI校準(zhǔn)。結(jié)論部分針對檢測結(jié)果做出相關(guān)疾病診斷或疑似診斷，必要時給出進(jìn)一步檢測建議。推薦程度：強烈建議。

共識4：免疫細(xì)胞亞群檢測的臨床報告一般只需提供檢測結(jié)果以及健康群體參考區(qū)間，檢測結(jié)果脫離參考區(qū)間的項目以升高（↑）或減低（↓）警示，除具有明確檢測目的或臨床截斷值的項目，否則一般無需提供結(jié)論及附圖。推薦程度：一般建議。

共識5：描述抗原表達(dá)比例需參考閾值，目的細(xì)胞群抗原表達(dá)率≥80%為陽性表達(dá)（簡稱表達(dá)），目的細(xì)胞群中胞膜抗原表達(dá)率為20%～＜80%或胞漿抗原表達(dá)率為10%～＜80%為部分陽性表達(dá)（簡稱部分表達(dá)），目的細(xì)胞群中胞膜抗原表達(dá)率<20%或胞漿抗原表達(dá)率<10%為陰性表達(dá)（簡稱不表達(dá)）；若有研究結(jié)果支持某界值具有相關(guān)臨床意義，則可采用特殊閾值并注明。推薦強度：強烈建議。

共識6：FCM臨床檢測項目中，建議使用增強（bri）或減弱（dim）描述病理性細(xì)胞（包括惡性、克隆性、異常細(xì)胞）的抗原表達(dá)強度改變；非病理性細(xì)胞（如免疫細(xì)胞和正常內(nèi)對照細(xì)胞）不同亞群的抗原表達(dá)強度采用高（hi）或低（lo）進(jìn)行描述。推薦強度：強烈建議。

FCM臨床檢測報告附流式圖要求有哪些？

FCM臨床診斷項目的檢測報告應(yīng)依據(jù)診斷需求提供全面、清晰的彩色流式圖，圖中應(yīng)包含診斷所需的設(shè)門信息、主要免疫標(biāo)志和熒光參數(shù)信息。免疫細(xì)胞亞群檢測項目如TBNK淋巴亞群分析僅報告成熟的非腫瘤性免疫細(xì)胞亞群的百分比和絕對計數(shù)值，可不提供檢測圖片。

共識7：FCM臨床檢測報告圖片建議采用彩色二維點圖。要求顯示比例尺和坐標(biāo)軸代表參數(shù)（包括FSC、SSC、熒光素及標(biāo)記抗體，上述參數(shù)指標(biāo)產(chǎn)生的強度信號）；一般熒光信號首選A，少數(shù)選擇H，幾乎不選擇W。進(jìn)行有核細(xì)胞分析時，檢測指標(biāo)的數(shù)值顯示方式：FSC一般使用lin，SSC使用lin和log均可，熒光信號絕大多數(shù)使用log或者指數(shù)或者雙指數(shù)。使用橫、縱坐標(biāo)離開原點的距離代表熒光信號強度（熒光強度）的強弱，必要時顯示MdFI或者MFI；圖片應(yīng)清楚顯示目的細(xì)胞群與內(nèi)對照細(xì)胞群的抗原表達(dá)關(guān)系。推薦強度：強烈建議。

共識8：FCM臨床檢測報告中應(yīng)描述設(shè)門方法，并提供完整的彩色圖片。臨床診斷圖片需依次設(shè)置活細(xì)胞門和單個細(xì)胞門，并從單個活細(xì)胞開始使用CD45/SSC設(shè)置各主要細(xì)胞群，必要時使用反向設(shè)門和序貫設(shè)門。推薦強度：強烈建議。

共識9：FCM臨床檢測圖片需提供單個活細(xì)胞中各主要細(xì)胞群的設(shè)門方式、占有核細(xì)胞百分比，所有檢測抗原在各主要細(xì)胞群的表達(dá)情況。對于腫瘤細(xì)胞因占有核細(xì)胞比例低，全圖不能清楚顯示的病例，建議另外提供重點顯示腫瘤細(xì)胞群與內(nèi)對照細(xì)胞群的圖片。推薦強度：強烈建議。

共識10：彩色二維點圖中，結(jié)合設(shè)門技術(shù)，每個實驗室可按照習(xí)慣設(shè)置不同細(xì)胞群的顏色，原則是同一個病例的多管組合圖上，使用不同顏色代表不同細(xì)胞群；盡量選擇鮮艷的顏色代表腫瘤細(xì)胞群或者重要的低比例細(xì)胞群（如原始細(xì)胞群）。建議將低比例、目的細(xì)胞群群置于上層，高比例、背景細(xì)胞群置于下層，必要時使用軟件功能突出顯示目的細(xì)胞群。代表不同細(xì)胞群的顏色應(yīng)清晰，色彩差別大。推薦強度：強烈建議。

FCM臨床檢測報告的審核與簽發(fā)？

FCM臨床診斷報告需要具備資質(zhì)的醫(yī)師或授權(quán)簽字人審核后簽發(fā)，簽發(fā)者和/或?qū)徍苏咭话阌舍t(yī)院和其他檢測機構(gòu)根據(jù)國家相關(guān)部分法規(guī)進(jìn)行資質(zhì)確定和能力考核后授權(quán)。報告中需注明檢測者、審核者、報告時間、實驗室地址和聯(lián)系方式等。

總之，FCM問世半個世紀(jì)以來，在臨床檢測中起到舉足輕重的作用，但是作為人工參與度極高的特殊檢驗技術(shù)，規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化和室間互認(rèn)困難，為此中國中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會檢驗醫(yī)學(xué)專業(yè)委員會委托王卉、劉貴建、崔巍主任三位通訊作者和全國眾多共識參與者相繼推出了五篇FCM相關(guān)專家共識，極大推動了規(guī)范化歷程，此次推出的專家共識，是業(yè)界又一重大舉措。

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